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價(jià)格:電議
型號:
采購度:755 原產(chǎn)地:美洲
發(fā)布時(shí)間:2012/4/28 16:07:30
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(抗卵巢抗體(IgA\\IgM\\IgG)價(jià)格
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保存溫度: 2-8℃
檢測方法:法
產(chǎn)品規格:24T/48T
封板膜: 2片(48)/2片(96)
適用于:科研實(shí)驗
ELISA 試驗時(shí),注意事項如下:
在ELISA中,進(jìn)行各項實(shí)驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗條件下進(jìn)行反應,觀(guān)察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的*適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時(shí),觀(guān)察陽(yáng)性標本的OD值。選擇OD值而蛋白量*少的濃度。對于多數蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。
在ELISA中,進(jìn)行各項實(shí)驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗系統里地滴定其工作濃度。
(2) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿(mǎn)意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
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更新時(shí)間:2024/6/12 9:40:04
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