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價(jià)格:電議
型號:
采購度:739 原產(chǎn)地:美洲
發(fā)布時(shí)間:2012/4/27 16:51:19
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腎病綜合癥出血熱病毒抗體(IgG\\IgM)新品上市
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實(shí)驗方法:法標 本:血清規 格:20T/40T
操作步驟:
用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱(chēng)洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對照孔及陽(yáng)性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀(guān)察結果:反應孔內顏色越深,陽(yáng)性程度越強,陰性反應為無(wú)色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
elisa產(chǎn)品范圍: 人,小大鼠,豬,兔,其它動(dòng)物細胞因子;細胞凋亡,活性多肽,自身抗體 ,血栓與止血, 骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內分泌,自身抗體科研ELISA檢測試劑盒
待檢樣本:體液,血清,血漿,細胞培養上清液,尿液,組織勻漿,心房水標本等等。
保存條件:2-8℃
試驗原理:
試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(ELISA).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進(jìn)行檢測。先將生物素標記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。
自備材料:
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項:
1. 試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄,不可保存。
2. 實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標板時(shí)應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7. 底物A應揮發(fā),避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感,避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
8. 加入試劑的順序應一致,以所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
9. 按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
更新時(shí)間:2024/6/12 9:40:04
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