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采購度:622 原產(chǎn)地:美洲
發(fā)布時(shí)間:2012/4/6 17:06:31
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上海(呋喃西林檢測試劑盒)
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操作步驟
實(shí)驗開(kāi)始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線(xiàn)。如樣品濃度過(guò)高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)允箻悠贩显噭┖械臋z測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?瞻卓准訕悠废♂屢100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為實(shí)驗結果性,每次實(shí)驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過(guò)氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時(shí)肉眼可見(jiàn)標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時(shí)藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了實(shí)驗結果的性,底物反應時(shí)間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(cháng)依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行檢測。樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上
清,保存過(guò)程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心
20 分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分) 。仔細收集上清,保存過(guò)程
中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/
分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時(shí),用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度
達到 100 萬(wàn)/ml 左右。通過(guò)反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分鐘左右
(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備
用。標本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4) ,用手工或勻漿器將標
本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉/分) 。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其
余冷凍備用。
新的一年里,上海恒遠生物將以更的產(chǎn)品、更精湛的技術(shù)、更完善的服務(wù)、更飽滿(mǎn)的熱情服務(wù)于大家。“呋喃西林檢測試劑盒”是您選擇(顧客至上,品質(zhì))。
更新時(shí)間:2024/8/27 9:20:23
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