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上海恒遠生物科技有限公司成立于2010年12月,集研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售為一體,以科研試劑生產(chǎn)、診斷試劑原料供應生產(chǎn)為核心,為全球來(lái)自高等院校、科研機構、診斷試劑生產(chǎn)廠(chǎng)家以及生物制藥公司的廣大客戶(hù)們提供高質(zhì)量生物產(chǎn)品。恒遠生物現擁有各物種基因產(chǎn)品50余萬(wàn)種;重組蛋白20余萬(wàn)種;數十個(gè)種屬的多克隆抗體3萬(wàn)多種和高質(zhì)量單克隆抗體數百種。恒遠品牌自主研發(fā)ELISA試劑盒,現已涵蓋20多個(gè)種屬,數千種產(chǎn)品,涉及腫瘤、激素、自身免疫、心血管、代謝等十多個(gè)研究領(lǐng)域。恒遠生物為大家總結,ELISA試劑盒實(shí)驗時(shí)至關(guān)重要的步驟有:
一、重要的洗滌:
不充分的洗滌會(huì )導致差異和高背景,從而帶來(lái)不理想的實(shí)驗結果。如果未結合的材料殘留在微孔板中,那么它會(huì )增加背景噪音。有必要的話(huà),可增加洗滌液中的鹽濃度,這會(huì )阻止非特異結合反應。如果背景過(guò)高,懷疑洗滌不夠時(shí),可以嘗試增加洗滌次數。
二、關(guān)鍵的封閉:
封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據微孔板中潛在的結合位點(diǎn)。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結合的機會(huì )。如果背景過(guò)高,懷疑封閉不充分,那么可以嘗試使用更高濃度的封閉液,或適當延長(cháng)封閉時(shí)間。目前主要有兩種類(lèi)型的封閉液:蛋白和非離子型去污劑。使用的類(lèi)型須取決于多個(gè)因素,包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測試劑。好的封閉液應降低非特異性結合,但它不應當與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。
三、抗體濃度須優(yōu)化:
如果試劑稍有不同,則可能需要優(yōu)化抗體的量。非特異的抗體結合會(huì )增加背景。為了防止這一點(diǎn),切勿使用過(guò)多的一抗或二抗。
四、檢測試劑要適量:
切勿使用過(guò)多的檢測試劑。如果濃度過(guò)高,或者未正確稀釋?zhuān)瑒t會(huì )導致高背景。ELISA試劑盒也不要顯色過(guò)度,如有必要,優(yōu)化一下何時(shí)應加入終止液。只有確保每一步操作都做到位,才會(huì )呈現完美的實(shí)驗結果。所以ELISA實(shí)驗的每一步都很重要,不可以掉以輕心。
更多實(shí)驗資訊可咨詢(xún)我司業(yè)務(wù)員。上海恒遠生物科技有限公司擁有自己的實(shí)驗室,備有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)研發(fā)團隊,實(shí)驗提供免費代測服務(wù),并提供精湛的技術(shù)服務(wù),如果您有實(shí)驗上的問(wèn)題歡迎前來(lái)咨詢(xún),為您提供專(zhuān)業(yè)的一對一技術(shù)指導。
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