品牌: 恒遠生物貨號: HYCC30031
中文名稱(chēng): 大鼠胚胎心肌細胞
規格: T25
形態(tài)特性: 上皮樣細胞生長(cháng)
生長(cháng)特性: 貼壁生長(cháng)
培養條件:DMEM+10%FBS
傳代方法: 1:2~1:6傳代；2~3天換液1次。
凍存條件: 無(wú)血清細胞凍存液
特征特性：該細胞由Kimes B和Brandt B從BD1X大鼠胚胎心臟組織的克隆細胞株亞克隆得到；表現出許多骨骼肌的特性。這個(gè)細胞株中的成肌細胞能融合形成多核的肌管，并對乙酰膽堿的刺激發(fā)生反應。如果培養基中的血清濃度下降到1%，融合很快發(fā)生。
一、細胞收到后處理
細胞在培養瓶中培養至良好狀態(tài)后灌滿(mǎn)培養液并封好瓶口是細胞運輸的常見(jiàn)辦法。收到細胞回到自己的實(shí)驗室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無(wú)菌操作，培養箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀(guān)察：未超過(guò)80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的培養液收集至離心管中，加入6ml培養基，放入37℃、孵箱培養；超過(guò)80%匯合度時(shí)，根據情況傳代或者凍存，具體操作見(jiàn)細胞培養步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養瓶的話(huà)，處理完后放入培養箱培養記得培養瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的培養基，另外一瓶用自己配的培養基），若是5%CO2的培養箱，可用密封培養瓶，擰緊瓶蓋后放入5%CO2培養箱，48H內要換液一次。
二、細胞培養步驟
1.培養皿/瓶用槍頭或移液管吸去原培養液。
2.無(wú)菌PBS或無(wú)菌生理鹽水洗滌3次（按培養體積加入）。
3.加入適量胰酶消化適當時(shí)間（一般胰酶為0.25%；9cm/10cm培養皿和25cm培養瓶，一次加入1mL胰酶。消化時(shí)間視細胞類(lèi)型等多種情況綜合考慮，一般如果是細胞株，非原代培養，消化1－2分鐘足矣）。
4.用槍頭吹打數十次（視細胞類(lèi)型而定。一般細胞株30－50次吧，耗時(shí)一般2分鐘左右）。
5. 加入適量體積wanquan培養基終止胰酶消化（如果是9cm/10cm培養皿和25cm培養瓶，可以加入1mL培養基；現在培養瓶（皿）里有2mL溶液）。
6.現在可以將溶液進(jìn)行分瓶（2mL）。如果是細胞株，直接均分到兩個(gè)培養瓶（皿）里。如果是原代培養，可以根據消化時(shí)間來(lái)對細胞進(jìn)行分離；因此可以將溶液（2mL）都轉入新的培養瓶（皿）。
7.將兩個(gè)培養瓶（皿）補足培養基到正常體積（果是9cm/10cm培養皿和25cm培養瓶，為5mL培養液）。
8.鏡下觀(guān)察。剛剛傳代細胞還沒(méi)貼壁，懸浮在溶液中，呈圓形。一般2h之內會(huì )貼壁，如果已經(jīng)貼壁，根據細胞類(lèi)型有不同的形態(tài)，但通常都不是圓形。
9.鏡下觀(guān)察無(wú)誤之后，再放入細胞培養箱。培養瓶（皿）放入之，可以用消毒酒精先擦一下。
10.傳代之后，第二天細胞換液一次。當然，也可以視情況而定。
更多實(shí)驗資訊可咨詢(xún)我司業(yè)務(wù)員。上海恒遠生物科技有限公司擁有自己的實(shí)驗室，備有業(yè)的技術(shù)研發(fā)團隊，于各種生物試劑，細胞，血清，ELISA試劑盒的研發(fā)與銷(xiāo)售，實(shí)驗提供免費代測服務(wù)，并提供精湛的技術(shù)服務(wù)，如果您有實(shí)驗上的問(wèn)題歡迎來(lái)咨詢(xún)，為您提供業(yè)的一對一技術(shù)指導。
原創(chuàng )作者：上海恒遠生物科技有限公司
總訪(fǎng)問(wèn)量：7465278 管理登錄
