檢測范圍：15ng/L - 480ng/L
使用目的：
本試劑盒用于測定大鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中列腺素E2（PGE2）含量。
實(shí)驗原理：
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠列腺素E2（PGE2）水平。用純化的大鼠列腺素E2（PGE2）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入列腺素E2（PGE2），再與HRP標記的列腺素E2（PGE2）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的列腺素E2（PGE2）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度（OD值），通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品中大鼠列腺素E2（PGE2）濃度。
標本要求 ：
1．標本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻進(jìn)行，提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟：
1.標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢�，用�?hù)可按照下列表在小試管中進(jìn)行稀釋。
480ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
240ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
120ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
60ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
30ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30后棄去，如此重復5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時(shí)藍色立轉黃色）。
測定：以空白孔調零，450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。
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